Xây dựng phương pháp định lượng itoprid trong huyết tương người bằng phương pháp HPLC với detector huỳnh quang

Tóm tắt

Một phương pháp mới đã được xây dựng để định lượng itoprid trong huyết tương người bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPCL) với detector huỳnh quang (bước sóng kích thích 265 nm và bước sóng phát xạ 344 nm). Phương pháp này sử dụng chiết xuất một bước, itoprid được tách khỏi huyết tương người, loại protein bằng dung môi tert-butyl methyl ether, sử dụng alfuzosin hydrochlorid làm chất chuẩn nội. Việc phân tách sắc ký thu được trong 10 phút, sử dụng cột pha đảo (C18, 250 mm × 4,6 mm, 5 µm), pha động đẳng dòng gồm acetonitril, tetrahydrofuran và đệm pH 3,5 (với tỷ lệ thích hợp), tốc độ dòng 1,2 ml/phút. Khoảng tuyến tính xác định được từ 5 ng/ml đến 1000 ng/ml. Giới hạn định lượng dưới là 5 ng/ml. Độ chính xác trong ngày và giữa các ngày nằm trong khoảng 86,2 % đến 108,5 %. Độ ổn định mẫu huyết tương chứa itoprid là 100 ngày ở -35 ^oC và 6 giờ ở nhiệt độ phòng. Phương pháp này có thể được áp dụng để xác định nồng độ itoprid trong huyết tương người trong các nghiên cứu BA-BE các chế phẩm chứa itoprid.