Xây dựng và thẩm định phương pháp LC-MS/MS định lượng đồng thời amlodipin, perindopril và chất chuyển hóa có hoạt tính perindoprilat trong huyết tương người.

Tóm tắt

Một phương pháp phân tích nhanh, đơn giản, năng suất cao và có tính đặc hiệu, sử dụng thiết bị LC-MS/MS, đã được phát triển để định lượng đồng thời amlodipin, perindopril và chất chuyển hóa có hoạt tính perindoprilat trong huyết tương người. Thiết bị LC-MS/MS Sciex Qtrap 6500+ được vận hành dưới chế độ ion hóa dương, sử dụng kiểu định lượng theo dõi nhiều phản ứng (MRM). Amlodipin, perindopril, perindoprilat và các chuẩn nội tương ứng được chiết xuất từ mẫu huyết tương sử dụng kĩ thuật tủa protein với tác nhân tủa là methanol. Mẫu sau xử lý được phân tích sắc ký trên cột pha đảo C18, kích thước 50 x2,1 mm, cỡ hạt 1,9 μmtheo chương trình pha động gồm dung dịch acid formic 0,1 % và methanol tại tốc độ dòng 0,3 ml/phút. Đường chuẩn xây dựng cho từng chất phân tích amlodipin, perindopril và perindoprilat lần lượt là 0,15-15 ng/ml; 1,25-125 ng/ml và 0,2-20 ng/ml với hệ số r > 0.99. Độ đúng trong khoảng 85 %-115 % với độ chính xác < 15 %. Tổng thời gian phân tích cho mỗi mẫu là 4,5 phút. Phương pháp là phù hợp để áp dụng cho các nghiên cứu sinh khả dụng, tương đương sinh học của các chế phẩm cố định liều amlodipin và perindopril.